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密理博超濾管如何使用？使用過程又需要注意哪些事項？
更新時間：2023-06-28 瀏覽次數(shù)：934
密理博超濾管具有快速超濾功能，能夠達到較高的濃縮倍數(shù)，輕松實現(xiàn)從稀釋和復雜的混和樣本中濃縮回收目的產(chǎn)物。垂直設計的超濾膜以及較大的有效濾膜表面積有助于快速的樣本處理，獲得較高樣本回收率（通常>90%），并達到30倍的濃縮。
根據(jù)標稱分子量限值(NMWL)的不同，典型處理時間為10-30分鐘。超濾膜的垂直設計也較大程度降低了溶質(zhì)極化造成的濾膜結(jié)垢；死體積設計能有效防止過度離心使樣本干掉而造成樣本損失。收集濾出液后，濃縮樣本（截留部分）可通過一個簡便的倒置（上下反轉(zhuǎn)）離心步驟而實現(xiàn)高效回收。超濾管未經(jīng)消毒，僅供一次使用。
密理博超濾管的應用：
1.濃縮或純化生物樣本。
2.純化組織培養(yǎng)提取液或細胞裂解液中的大分子成分，去除反應液中的引物、接頭或分子標記，在HPLC前去除蛋白質(zhì)。
3.除鹽，緩沖液更換，或滲濾。
密理博超濾管使用：
1.預處理：新超濾管：使用前用純水浸泡，冰箱預冷10min。然后將水倒出，置于冰上預冷2-5min，加樣；
舊超濾管：倒出管內(nèi)的乙醇浸泡液，用純水沖洗干凈10遍(注意水流速盡量平緩，防止沖破濾膜)，置于冰上預冷2-5min，加樣。
2.加樣：如超濾管中有少許殘留水可將內(nèi)管倒置1000×g離心1min，移液槍移取適量樣本加入超濾管中。
3.離心：配平，12000×g離心（15-30min），等達到目的轉(zhuǎn)速后方可離開。
4.樣本收集：外管濾液為除去部分蛋白的樣本上清，如需取濃縮后樣本用于其他實驗，則另取外管，內(nèi)管倒置，1000×g離心1-2min。
5.清洗：使用完的超濾管用純水反復清洗5次，再用75%乙醇沖洗3次。
注意事項：
1.其最大離心力不能超過12000g，否則會導致濾膜破損；
2.超濾樣本會損失五分之一至二分之一的樣本量，主要取決于樣本中蛋白含量；
3.若管底有可見的蛋白沉淀，可以先加入純水，然后用槍頭吹打，注意不要碰到膜，吹打至沉淀懸起，然后倒掉，不可用自來水猛沖；
4.內(nèi)管不能用烘箱進行烘干。